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近期,“阿斯巴甜致癌”爭議引起廣泛關(guān)注。國際癌癥研究機構(gòu)、聯(lián)合國糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織食品添加劑聯(lián)合專家委員會近日發(fā)布報告,將阿斯巴甜歸為“可能對人類致癌”(2B類致癌物)之列。
阿斯巴甜是國際食品法典委員會(CAC)及中國、美國、歐盟等批準(zhǔn)合法使用的食品添加劑。CAC批準(zhǔn)阿斯巴甜可用于冷凍飲品、口香糖、糖果、焙烤食品、水產(chǎn)品、調(diào)味品、碳酸飲料等,規(guī)定最大使用量為0.3g/kg——10.0g/kg。
基于標(biāo)準(zhǔn)要求,可使用悟空K2025高效液相色譜儀測定阿斯巴甜含量。
實驗原理
K2025高效液相色譜儀
與阿斯巴甜同屬人工合成的二肽類甜味劑的阿力甜,也是人們常用的甜味劑。阿斯巴甜的甜度可達蔗糖的200倍,阿力甜可達蔗糖甜度的2000倍。
此實驗,我們用高效液相色譜法,使用悟空K2025高效液相色譜儀測定飲料中兩者的含量。
試樣中的阿斯巴甜、阿力甜在200 nm處有紫外吸收,經(jīng)高效液相色譜測定,外標(biāo)法定量。
實驗方案
色譜條件
色譜柱:C18色譜柱,4.6×250 mm,5 μm或者相當(dāng)?shù)纳V柱;
流動相:乙腈 - 水(20+80);
流速:0.8 mL/min;
進樣量:20 μL;
柱溫:30℃;
檢測器及波長:紫外-可見光檢測器,檢測波長為200 nm。
重復(fù)性測試
按照色譜條件進行采集,混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(阿斯巴甜和阿力甜濃度均為5 μg/mL)的色譜圖如圖1所示,積分結(jié)果如表1所示。
圖1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度均為5 μg/mL)的色譜圖
表1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度均為5 μg/mL)色譜圖積分結(jié)果
目標(biāo)物 | 阿斯巴甜 | 阿力甜 |
保留時間 (min) | 7.225 | 11.158 |
峰面積 (mAU.s) | 387.572 | 222.461 |
峰高 (mAU) | 39.370 | 14.850 |
理論塔板數(shù) | 12959 | 12977 |
分離度 | - | 12.19 |
對稱/拖尾因子 | 1.18 | 1.08 |
由表1中數(shù)據(jù)可知,阿斯巴甜的理論塔板數(shù)為12959,拖尾因子為1.18;阿力甜的理論塔板數(shù)為12977,拖尾因子為1.08。
將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度均為5 μg/mL)連續(xù)進樣7針,疊加的色譜圖如圖2所示,結(jié)果見表2。
圖2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度均為5μg/mL)連續(xù)進樣7針疊加的色譜圖
表2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度均為5μg/mL)連續(xù)進樣7針重復(fù)性數(shù)據(jù)統(tǒng)計
目標(biāo)物 | 阿斯巴甜 | 阿力甜 | ||
| 保留時間 | 峰面積 | 保留時間 | 峰面積 |
1 | 7.225 | 387.572 | 11.158 | 222.461 |
2 | 7.208 | 387.416 | 11.133 | 222.368 |
3 | 7.217 | 386.782 | 11.142 | 221.505 |
4 | 7.217 | 387.468 | 11.133 | 222.415 |
5 | 7.225 | 387.013 | 11.150 | 222.610 |
6 | 7.225 | 386.430 | 11.150 | 222.238 |
7 | 7.217 | 386.083 | 11.150 | 222.631 |
平均值 | 7.219 | 386.966 | 11.145 | 222.318 |
RSD% | 0.088 | 0.146 | 0.085 | 0.173 |
由表2中數(shù)據(jù)可知,混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度均為5 μg/mL)連續(xù)進樣7針重復(fù)性測試,阿斯巴甜保留時間的RSD為0.088%,峰面積的RSD為0.146%,阿力甜保留時間的RSD為0.085%,峰面積的RSD為0.173%,均具有良好的定性定量重復(fù)性。
含量測定
校準(zhǔn)曲線
按照色譜條件進行采集,將混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液上機測定,混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液疊加的色譜圖如圖3所示。
圖3 混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液疊加色譜圖
阿斯巴甜、阿力甜在測定濃度范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,確定系數(shù)R2均在0.9999以上。
含量測定
按照步驟對飲料樣品進行處理,并進行加標(biāo)回收實驗??瞻兹芤旱纳V圖、樣品的色譜圖及樣品加標(biāo)的色譜圖如圖4~圖6所示。
圖4空白的色譜圖
圖5 樣品的色譜圖
圖6 樣品加標(biāo)的色譜圖
經(jīng)計算,樣品中未檢出阿斯巴甜及阿力甜,加標(biāo)回收率分別為102.6%和98.6%。
結(jié)論
通過對阿斯巴甜、阿力甜的理論塔板數(shù)、重復(fù)性、靈敏度、線性的測試以及對樣品中阿斯巴甜和阿力甜的含量進行測定,實驗結(jié)果表明:
阿斯巴甜的理論塔板數(shù)為12959,拖尾因子為1.18;阿力甜的理論塔板數(shù)為12977,拖尾因子為1.08,均有良好的峰型;混合標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進樣7針重復(fù)性測試,阿斯巴甜保留時間的RSD為0.088%,峰面積的RSD為0.146%,阿力甜保留時間的RSD為0.085%,峰面積的RSD為0.173%,均具有良好的定性定量重復(fù)性;
靈敏度測試中,阿斯巴甜的儀器檢出限為7.229 ng/mL,儀器定量限為24.095 ng/mL;阿力甜的儀器檢出限為19.771 ng/mL,儀器定量限為65.902 ng/mL;阿斯巴甜、阿力甜在測定濃度范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系,確定系數(shù)R2均大于0.9999;對樣品進行測試,樣品中未檢出阿斯巴甜及阿力甜,加標(biāo)回收率分別為102.6%和98.6%。
因此,Wooking K2025可以滿足《GB 5009.263-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定》中阿斯巴甜和阿力甜含量測定的需求。
關(guān)于甜味劑是否會損害健康的爭議從未停止。但“合理適量”是永遠的重點。
國家食品安全風(fēng)險評估中心回應(yīng):阿斯巴甜按照我國現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范使用可以保障安全,將繼續(xù)關(guān)注并通過嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)和嚴(yán)格的監(jiān)管,確保食品安全的底線。
拋開劑量談危害是不科學(xué)的,雖然阿斯巴甜并沒有那么可怕,但我們?nèi)砸⒁饨^不能無限攝入。